人胰島素原  (PI)ELISA使用說明書

胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 ， 它是由由胰島β細胞合成和分泌 ， 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ，只有極少量的胰島素原釋放入血 ，在病理情 況下 ，胰島β細胞釋放胰島素原增多 ，血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結(jié)構(gòu)。 它是由芝加哥大學(xué)的Donald F. Steiner教授在1967年發(fā)現(xiàn)的。

本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 。往預(yù)先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ，依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測 抗體 ，HRP  酶結(jié)合物 ， 中間經(jīng)過溫育和洗滌 ，用底物TMB  顯色 ，TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍色 ，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm  波長下測定

吸光度（OD  值） ，計算樣品濃度。

靈敏度：4.79pg/mL

檢測范圍：12.5-800pg/mL

特異性：可檢測樣本中人的PI ，且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。

試劑盒性能：

1.    重復(fù)性 ：板內(nèi)變異系數(shù)小于  10% ，板間變異系數(shù)小于  10%。

2.    回收率 ：在選取的健康人血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入  3  個不同

濃度水平的人PI ，計算回收率。

3.    線性稀釋：分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入

高濃度人PI ，在標(biāo)準(zhǔn)曲線動力學(xué)范圍內(nèi)進行稀釋 ，評估線性。